In-Cell Western
Viele Assays aus dem Bereich Drug Discovery verwenden Zell-Lysate oder gereinigte Proteine. Idealerweise werden physiologisch relevante Antworten jedoch im zellulären Kontext der Proteine gewonnen. Zell-Basierte Assays sind ein Ansatz um bessere Übertragbarkeit auf die Wirkung in vivo zu erzielen.
LI-COR Biosciences hat sich der Herausforderung gestellt, und hat ein vollautomatisiertes, hochdurchsatzfähiges Instrument für die Analyse von In-Cell Western und anderen Zellkultur Assays entwickelt das Aerius Infrarot Imaging System.
Der Aerius ist mit einem dualen Lasersystem ausgestattet, das ihm erlaubt zwei Zielstrukturen zeitgleich in der Zelle nachzuweisen. Hierzu werden Biomoleküle mit infrarotmarkierten Farbstoffen im Anregungsbereich von 700 und 800 nm markiert und anschließend gescannt. Der Nahinfrarot-Bereich des Lichtspektrums hat den Vorteil nur eine sehr geringe Autofluoreszenz bei Mikrotiterplatten und Biomolekülen hervorzurufen. Das daraus resultierende, sehr gute Signal-Rausch Verhältnis ist Grund für die hohe Sensitivität des Aerius, der Konzentrationen im einstelligen Picogramm Bereich nachweisen kann.
Durch die Unmittelbarkeit des generierten Infrarot-Signals sind die Daten, im Gegensatz zu enzymkinetisch erzeugten Signalen, über einen weiten Bereich linear, und können schnell und akkurat quantifiziert werden.
Neben hoher Sensitivität und Quantifizierbarkeit überzeugt der In-Cell Western auf dem Aerius durch hohe Reproduzierbarkeit. Er eignet sich daher optimal für die Analyse von Signaltransduktionswegen oder zur Bestimmung von IC50 Werten beim sekundären Wirkstoffscreening.
Der Aerius ist mit einem dualen Lasersystem ausgestattet, das ihm erlaubt zwei Zielstrukturen zeitgleich in der Zelle nachzuweisen. Hierzu werden Biomoleküle mit infrarotmarkierten Farbstoffen im Anregungsbereich von 700 und 800 nm markiert und anschließend gescannt. Der Nahinfrarot-Bereich des Lichtspektrums hat den Vorteil nur eine sehr geringe Autofluoreszenz bei Mikrotiterplatten und Biomolekülen hervorzurufen. Das daraus resultierende, sehr gute Signal-Rausch Verhältnis ist Grund für die hohe Sensitivität des Aerius, der Konzentrationen im einstelligen Picogramm Bereich nachweisen kann.
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