18.02.2008 • Labordiagnostik • Produktfokus Analytica

Light Chain Spezifische Antikörper für Western Blotting

Nach der Einführung unseres neuen, problemlösenden Anti-Hase IgG, Light Chain Spezifische Antikörper für Western Blotting, bieten wir nun zusätzlich auch Anti-Maus IgG, Light Chain Spezifische Antikörper und Anti-Ratte IgG, Light Chain Spezifische Antikörper für Western Blotting an.

Anti-IgG, Light Chain Spezifische Antikörper reagieren stark mit nativen Primärantikörpern, die zum Nachweis von spezifischen Proteinbanden bei Western Blots verwendet werden. Anti-Light Chain Spezifische Antikörper binden sich jedoch nicht an die reduzierte oder denaturierte IgG Heavy Chain Bande (50 kD) bei Blots (Abbildungen A, C und D). Daher wird durch die Verwendung unserer neuen Anti-Light Chain Spezifischen Antikörper der Nachweis von Antigenen mit einem Molekulargewicht um 50 kD nicht durch große Mengen von reduzierten und denaturierten IgG Heavy Chains von Primärantikörpern, die zur Immunopräzipitation (IP) verwendet werden, verschleiert (Beispiel siehe Abbildung B).

Abbildungen A-D. Heavy (50 kD) und Light (25 kD) Chains mit reduziertem und SDS-denaturiertem Maus IgG ((A-B), Ratte IgG (C) und Hase IgG (D) wurden durch SDS-PAGE (Linie mit rote Ziffern) abgespaltet und mit Western Blots unter Verwendung von HRP-Ziege Anti-Maus IgG, Light Chain Spezifisch (A), HRP-Ziege Anti-Maus IgG (H+L)(B), HRP-Ziege Anti-Ratte IgG, Light Chain Spezifisch (C), und HRP-Maus Anti-Hase IgG, Light Chain Spezifisch (D) nachgewiesen.

Es wurde auch bei stark mit IgG überlasteten Linien keine Heavy Chain Bande nachgewiesen, wenn Anti-IgG, Light Chain Spezifische Antikörper zum Nachweis verwendet wurden (A, C und D). Es wurden jedoch Heavy und Light Chain Banden bei Anti-IgG (H+L)(B) nachgewiesen. Linien mit blauen Ziffern enthielten reduziertes und SDS-denaturiertes Ziege IgG (A, B und C) oder Maus IgG (D), die als Hintergrundkontrollen dienten.

Obwohl die neuen Antikörper stark mit nativen IgG Light Chains reagieren, reagieren sie nicht so stark mit den reduzierten und denaturierten Light Chains bei Blots. Daher werden sie nicht für den sensitiven oder quantitativen Nachweis von reduzierten und denaturierten Light Chains bei Western Blots empfohlen.
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